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雙靶點CAR-T的脫靶檢測可以采用多種方法,包括MPA試驗、組織交叉反應(yīng)(TCR)和體外細(xì)胞殺傷試驗等。以MPA試驗為例,其檢測過程需要根據(jù)雙CAR的結(jié)構(gòu)策略來進(jìn)行抗體的合成和開展MPA試驗??傮w原則是合成的、用于MPA檢測的抗體結(jié)構(gòu)要盡量反映T細(xì)胞表面表達(dá)的CAR的真實結(jié)構(gòu)。例如,如果雙CAR是串聯(lián)在一起的,即它們形成了一個二價串聯(lián)抗原識別結(jié)構(gòu),那么可以合成一個類似的二價串聯(lián)抗體進(jìn)行MPA檢測,來評估CAR-T對不同抗原的特異性結(jié)合能力,從而判斷其是否存在脫靶效應(yīng)。如果雙CAR是分開的,那么需要分別針對每個靶點,合成含有CAR結(jié)構(gòu)的抗體,然后進(jìn)行兩個獨立的MPA檢測。