- 流式細胞術(shù) (Flow Cytometry) 是一種用于計數(shù)和檢查懸浮在流體中的微觀顆粒的技術(shù)。它允許同時對流經(jīng)光學和/或電子檢測設備的單個細胞的物理和/或化學特性進行多參數(shù)分析。流式細胞術(shù)可以高速、準確、客觀檢測單個微粒的多參數(shù)的現(xiàn)代細胞分析技術(shù),目前,在藥物開發(fā)的早期階段,尤其是抗腫瘤藥物,通過流式多色檢測技術(shù)進行復雜的細胞分析,能夠為科研工作者較大限度地提供有效數(shù)據(jù)。
- 截至目前,美迪西承接的流式檢測項目已經(jīng)近400項,包括:細胞表面抗原表達的流式檢測;細胞增殖、細胞分化、細胞凋亡等的流式分析;動物外周血及各免疫器官檢測;移植瘤模型流式檢測等。美迪西流式檢測團隊將每一個案例的特點與多年實戰(zhàn)經(jīng)驗和技術(shù)積累相結(jié)合,謹慎地將優(yōu)質(zhì)實驗結(jié)果提交到客戶手上,持續(xù)助力客戶的研發(fā)項目獲批。
流式細胞術(shù)的應用
- 流式細胞術(shù)應用于藥物發(fā)現(xiàn):在治療靶點和聯(lián)合用藥的創(chuàng)新研究中,可以幫助研究者在藥物開發(fā)的前期工作中展示不同個體之間的生物學效應的差異,以進一步闡明有效性的作用機理;幫助研究人員對腫瘤的“微環(huán)境”、外周血和其他宿主組織中的免疫系統(tǒng)進行高通量和穩(wěn)健的定量分析,實現(xiàn)更清楚地預測免疫治療療效的目的,助力免疫治療方法的大規(guī)模發(fā)展。流式細胞術(shù)已用于藥物發(fā)現(xiàn)過程的每個階段,從靶點鑒定到先導化合物,大分子藥物,ADC 和疫苗開發(fā)。細胞中的有效藥物靶標幾乎涵蓋了所有可用的生物分子結(jié)構(gòu):細胞膜,參與機械功能或信號傳導的任何蛋白質(zhì),低至基因水平 DNA 及其他較小的分子如 RNA 等。
- 以高通量方式表征大型和多樣化的細胞群在初始靶標鑒定中很有用。該過程可以通過用熒光探針標記與疾病有關(guān)的細胞內(nèi)外的分子特征來進一步優(yōu)化,且通過這種方式,可以快速評估細胞的結(jié)構(gòu)和蛋白特征,例如特定蛋白質(zhì)的豐度或細胞膜的完整性。在靶蛋白鑒定和先導化合物產(chǎn)生之后,可以通過流式細胞術(shù)研究藥物的功效和毒性。
- 流式細胞術(shù)應用于免疫學檢測流式細胞術(shù)通常與使用單克隆抗體來識別免疫活性細胞、量化表面決定簇表達的變化以及在測試其功能特征之前分離細胞群亞群有關(guān)。多雙激光系統(tǒng)、多色熒光的發(fā)展以及用于多參數(shù)分析的計算系統(tǒng)的改進有助于改進診斷、預后和監(jiān)測治療。流式細胞術(shù)的進步現(xiàn)在允許在一天內(nèi)對數(shù)百個樣本進行自動化、多參數(shù)分析。隨著計算機速度和存儲能力的提高,流式細胞術(shù)可以促進免疫學研究領(lǐng)域。
- 流式細胞術(shù)在藥物研發(fā)中的優(yōu)勢在治療靶點和聯(lián)合用藥的創(chuàng)新研究中,可以幫助研究者在藥物開發(fā)的前期工作中展示不同個體之間的生物學效應的差異,以進一步闡明有效性的作用機理;幫助研究人員對腫瘤微環(huán)境、外周血和其他宿主組織中的免疫系統(tǒng)進行高通量和穩(wěn)健的定量分析,實現(xiàn)更清楚地預測免疫治療療效的目的,助力免疫治療方法的大規(guī)模發(fā)展。
美迪西流式技術(shù)平臺服務介紹
- 美迪西流式技術(shù)平臺致力于探索和洞見腫瘤免疫靶向治療藥物的進展,于早期研發(fā)階段提供準確的可依靠的試驗預測數(shù)據(jù)。我們的團隊具有豐富的實驗操作、流式方法開發(fā)和數(shù)據(jù)分析經(jīng)驗,人均可獨立負責項目。平臺配備有 4 臺 BD 品牌的強大流式細胞檢測儀,新引進的高參數(shù)的 BD FACSymphony A5 流式細胞分析儀,配置五激光 31 參數(shù),可同時啟用多達 29 種顏色,能夠滿足客戶科研和分析需要。平臺建立至今已積累了眾多國內(nèi)外知名醫(yī)藥企業(yè)及科研機構(gòu)客戶,包括日本武田制藥、上海恒瑞醫(yī)藥、廣州百奧泰以及三生國建等,并達成多年的持續(xù)合作,獲得客戶持續(xù)的信任和好評。相關(guān)推薦:
美迪西流式細胞分選服務平臺 - 方法開發(fā)和樣品檢測美迪西流式平臺有小鼠、大鼠、犬、猴、人等種屬以及免疫缺陷、轉(zhuǎn)基因、人源化等動物模型的流式檢測方法開發(fā)和樣本檢測經(jīng)驗,擁有外周血、脾臟、淋巴節(jié)、骨髓、腫瘤、肝臟、肺臟等多種樣本處理經(jīng)驗。
- 建立了從基礎(chǔ)分析方案(T、B、NK細胞)到復雜的檢測分析方案(調(diào)節(jié)性T細胞、髓系細胞分析、干細胞分化等),涉及細胞表面蛋白、胞內(nèi)/核內(nèi)蛋白(轉(zhuǎn)錄因子/趨化因子/細胞因子等)檢測,可以滿足客戶檢測分析需求。
- 美迪西流式平臺提供采用 ELISA、Luminex、MSD、EliSpot、FluoroSpot、流式CBA、Bio-Plex 200懸浮芯片技術(shù)等進行高參數(shù)的細胞因子檢測服務,每次檢測僅需微量樣本,檢測特異性強,穩(wěn)定性好,可重復性高。
- 抗體藥物受體占有率(RO)項目2017年至今,已完成臨床/臨床前RO檢測多項,涉及PD-1,CD20,CD47和TIGIT等多種不同靶點的檢測。
- 新型免疫細胞制品藥物的生物分析包括干細胞、CAR-T細胞以及CAR-NK細胞等細胞治療產(chǎn)品及基因療法藥物的生物分析。
Assay Cell Medicilon capability
(Human,Mouse,Rat,Monkey,Dog)FACS T cell /Treg Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey,Dog) B cell Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey,Dog) NK cell Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey) Macrophage,Monocyte,Neutrophil Yes (Human,Mouse,Monkey) DC cell Yes (Human,Mouse,Monkey) MDSC Yes (Human,Mouse,Monkey) Checkpoint Yes (Human,Mouse) Receptor Occupancy Yes (Human,Mouse,Monkey) Cytokine Phosphorylation Yes (Human,Mouse) Elisa Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey) CBA Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey) Luminex Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey) MSD Yes (Human,Mouse,Rat,Monkey) ELISpot , FluoroSpot Yes (Human,Mouse,Monkey) Cell differentiation
polarizationT/M1/M2 macrophage Yes (Human) Cell cytotoxicity ADCC, ADCP Yes (Human) 持續(xù)更新中食蟹猴細胞亞群流式檢測實例小鼠NK、T細胞亞群流式檢測實例 - 美迪西FACS檢測儀器設備BD Symphony A3/Fortessa/Celesta 可以檢測不同的血液和組織樣本
擁有5激光,28通道配置;
利用全反射的光路結(jié)構(gòu)設計,避免透射過程對光信號的損耗,提高分析的靈敏度,能夠識別和分析罕見的細胞類型和情況;
先進的流式產(chǎn)品,可實現(xiàn)對免疫系統(tǒng)大數(shù)據(jù)的獲取和分析,為探索未知的免疫組學提供了廣闊平臺。
- 美迪西案例: FACS 檢測在 FCM 處理和檢測后,可以使用 FLOWJO 對血液/淋巴結(jié)/脾臟/骨髓/腫瘤等樣本進行分析。目前已有 50 多個經(jīng)過驗證的 Panels。Data shown was Mouse Treg&Teff Panel_mouse_Tumor在 FCM 處理和檢測后,可以使用 FLOWJO 對血液/淋巴結(jié)/脾臟/骨髓/腫瘤等樣本進行分析。目前已有 50 多個經(jīng)過驗證的 PanelsData shown was Cyno T/B/NK Panel_monkey_Blood血樣經(jīng)過 FCM 處理和檢測后,可以使用 Flowjo 進行受體占位分析。Data shown was Receptor Occupancy_Cynomolgus monkey_Blood
- 美迪西多因子檢測服務儀器設備通過 Covaris E220R/BIO-RAD Bio-Plex 200/MD SPECTRAMAX M2/MSD 處理細胞因子后,可以分析不同的血清/血漿和組織樣本,可檢測多達 40 多個因子。Covaris E220 系列超聲破碎儀可以非??焖俸屯耆剡M行均質(zhì)化、樣品分散和樣品抽提。樣本回收效率高,重復性好,整個處理過程恒溫,非接觸。Bio-Plex 200 系統(tǒng)采用流式細胞技術(shù)對染色的微球在液流路中逐個循序通過。相較于傳統(tǒng)的 ELISA 檢測方案,在樣本使用量和檢測通量方面優(yōu)勢明顯,大大節(jié)省了人力和物力成本。
- 美迪西案例: Cytokine 檢測細胞上清/血清/血漿/肝臟/肺臟/腫瘤等樣本經(jīng)過體內(nèi)或體外給藥刺激后可進行檢測分析。Data shown was CBA_Cynomolgus monkey_PlamsaPBMC/MNC/脾臟等樣本經(jīng)體內(nèi)或體外給藥刺激后,可通過 CTL 熒光酶聯(lián)免疫斑點分析儀 (CTL-ImmunoSpot S6) 檢測分析。Data shown was EliSpot/FluoroSpot_PBMC
- 細胞功能檢測與流式細胞儀,酶標儀或熒光顯微鏡配合使用檢測細胞分化/溶解/吞噬/殺傷活性,適用于多種哺乳動物細胞系。
- 美迪西案例: 細胞功能檢測腫瘤細胞經(jīng) Daratumumab 或 Rituximab 體外孵育后,更容易被巨噬細胞吞噬。樣本經(jīng)由 FCM 處理和檢測后,可用 Flowjo 對細胞系/血液/組織樣本分析。Data shown was ADCP_PBMC
總結(jié)與展望
- 自腫瘤,自身免疫病及呼吸道疾病等發(fā)展日益復雜以來,流式細胞術(shù)已成為功能和安全性評價中重要的分析手段。借助新一代的高速單光子傳感器,流式細胞術(shù)將可能發(fā)展成為較靈敏的熒光檢測系統(tǒng),從而帶來新的可能性,例如進行l(wèi)ifetime fluorescence analysis,可以觀察到蛋白構(gòu)象變化。隨著高度冷卻、低噪聲的單光子傳感器技術(shù)完全數(shù)字化,將使絕對定量成為可能,將測量實際光子數(shù),而不是現(xiàn)在流式中常用的arbitrary units,使得世界各地的儀器之間絕對定量結(jié)果可以進行直接比較,將對臨床流式和藥理學產(chǎn)生巨大影響。流式細胞術(shù)應用的最終目標是在單細胞水平上發(fā)現(xiàn)細胞受體和功能之間直接和決定性關(guān)系。今天的大多數(shù)流式細胞儀都集中在免疫表型上,但免疫分型絕不是流式細胞術(shù)的唯一機會,如果將流式細胞術(shù)中無法常規(guī)檢測的指標與細胞周期、代謝和結(jié)構(gòu)組分等相結(jié)合起來,未來的應用場景幾乎是無限的。