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新聞資訊

美迪西細(xì)胞增殖檢測(cè)

2016-06-02
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細(xì)胞增殖檢測(cè)作為一種實(shí)驗(yàn)技術(shù)方法, 不僅在研究細(xì)胞的基本生物學(xué)特征中非常重要, 而且是分析細(xì)胞狀態(tài)、研究遺傳性狀和評(píng)估應(yīng)激反應(yīng)的一種基本方法。美迪西細(xì)胞增殖檢測(cè)服務(wù)提供了一種靈敏度高、經(jīng)濟(jì)的細(xì)胞增殖檢測(cè)服務(wù)。細(xì)胞增殖的檢測(cè)方法主要包括:BrdU,CCK8,EdU等,其中EdU檢測(cè)方法是最新的細(xì)胞增殖檢測(cè)方法。我們擁有一支專業(yè)的細(xì)胞水平團(tuán)隊(duì)為您服務(wù),如需詳情請(qǐng)聯(lián)系我們。

備注:如果細(xì)胞株需要購(gòu)買,細(xì)胞費(fèi)用和運(yùn)費(fèi)由客戶支付。

細(xì)胞增殖檢測(cè)

美迪西細(xì)胞水平測(cè)定服務(wù)

細(xì)胞毒性分析
細(xì)胞凋亡檢測(cè)分析
細(xì)胞遷移分析
細(xì)胞侵襲分析
HTRF 細(xì)胞水平檢測(cè)分析
免疫染色分析
免疫熒光分析(96/384 孔板)
報(bào)告基因分析(綠色熒光蛋白/熒光素酶)
放射性配體受體結(jié)合試驗(yàn)
細(xì)胞攝取分析
基因敲除分析
MicroRNA過表達(dá)分析
MicroRNA 敲除分析
有關(guān)腺病毒/逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒 載體的應(yīng)用分析
美迪西建立了100多種細(xì)胞株用于細(xì)胞水平測(cè)定。
乳腺癌細(xì)胞
大腸癌細(xì)胞
白血病細(xì)胞
肝癌細(xì)胞
腎癌細(xì)胞
肺癌細(xì)胞
黑素瘤細(xì)胞
卵巢癌細(xì)胞
胰腺細(xì)胞
胃癌細(xì)胞


細(xì)胞增殖檢測(cè)方法  

方法一:EdU
EdU是一種胸腺嘧啶核苷類似物,能夠在細(xì)胞增殖時(shí)期代替胸腺嘧啶(T)滲入正在復(fù)制的DNA分子中,通過基于EdU與Apollo?熒光染料的特異性反應(yīng)快速檢測(cè)細(xì)胞 DNA 復(fù)制活性,適用于細(xì)胞增殖、細(xì)胞分化、生長(zhǎng)與發(fā)育、DNA 修復(fù)、病毒復(fù)制、細(xì)胞標(biāo)記示蹤等方面的研究,尤其適合進(jìn)行siRNA、miRNA、小分子化合物及其他藥物的篩選實(shí)驗(yàn)。
與BrdU檢測(cè)方法相比,EdU檢測(cè)方法更快速、更靈敏、更準(zhǔn)確。EdU與T非常相似,而EdU染料只有BrdU抗體的1/500,在細(xì)胞內(nèi)很容易擴(kuò)散,無(wú)需DNA變性(酸解、熱解、酶解等),可有效避免樣品損傷,而且無(wú)需抗原抗體反應(yīng),能在細(xì)胞和組織水平更準(zhǔn)確地反映 DNA 復(fù)制活性。


細(xì)胞增殖檢測(cè)


方法二:CCK-8

CellCountingKit-8簡(jiǎn)稱CCK-8試劑盒,是一種基于WST-8的廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的快速高靈敏度檢測(cè)試劑盒。WST-8是一種類似于MTT的化合物,在電子耦合試劑存在的情況下,可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成橙黃色的formazan。細(xì)胞增殖越多越快,則顏色越深;細(xì)胞毒性越大,則顏色越淺。對(duì)于同樣的細(xì)胞,顏色的深淺和細(xì)胞數(shù)目呈線性關(guān)系。
CCK-8的原理跟MTT其實(shí)是相同的,不同之處在于CCK-8法生成的formazan是水溶性的,不需要再吸出培養(yǎng)液加入有機(jī)溶劑溶解這個(gè)步驟,因此可以減少一定的誤差。其他優(yōu)點(diǎn)就是重復(fù)性優(yōu)于MTT;對(duì)細(xì)胞毒性?。粸?瓶溶液,毋需預(yù)制,即開即用。但是CCK-8比MTT的價(jià)格要貴不少。
服務(wù)內(nèi)容:
用CCK-8(Cell Counting Kit-8)試劑盒檢測(cè)細(xì)胞增殖、細(xì)胞毒性,CCK-8為MTT法的代替方法,可用于藥物篩選、細(xì)胞增殖測(cè)定、細(xì)胞毒性測(cè)定、腫瘤藥敏試驗(yàn)。


方法三:MTT

又稱MTT比色法,是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲瓚(Formazan)并沉積在細(xì)胞中,而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜(DMSO)能溶解細(xì)胞中的甲瓚,用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在490nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值,可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi),MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。

優(yōu)點(diǎn):經(jīng)濟(jì)、靈敏度高,可用于大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。
缺點(diǎn):由于MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的formazan結(jié)晶產(chǎn)物不溶于水,需有機(jī)溶劑溶解后才能檢測(cè),這不僅使工作量增加,也會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性產(chǎn)生影響,而且有機(jī)溶劑對(duì)實(shí)驗(yàn)人員也有損害。
服務(wù)內(nèi)容:細(xì)胞培養(yǎng)與接種;處理(如藥物處理等);MTT檢測(cè)及數(shù)據(jù)分析;技術(shù)服務(wù)報(bào)告提交。


方法四:BrdU
Brdu,即5-Bromo-2'-Deoxyuridine,中文全名5-溴脫氧尿嘧啶核苷,為胸腺嘧啶的衍生物,可代替胸腺嘧啶在DNA合成期(S期),活體注射或細(xì)胞培養(yǎng)加入,而后利用抗Brdu單克隆抗體,ICC染色,顯示增殖細(xì)胞。同時(shí)結(jié)合其它細(xì)胞標(biāo)記物,雙重染色,可判斷增殖細(xì)胞的種類,增殖速度,對(duì)研究細(xì)胞動(dòng)力學(xué)有重要意義。
BrdU(5-溴脫氧尿嘧啶核苷)法檢測(cè)細(xì)胞增殖原理:BrdU是胸腺嘧啶的衍生物,常用于標(biāo)記活細(xì)胞中新合成的DNA,可代替胸腺嘧啶選擇性整合到復(fù)制細(xì)胞中新合成的DNA中(細(xì)胞周期S期)。這種摻入可以穩(wěn)定存在,隨著DNA復(fù)制進(jìn)入子細(xì)胞中。 BrdU 特異性抗體可以用于檢測(cè)BrdU的摻入,從而判斷細(xì)胞的增殖能力。
BrdU 是光敏型,所以必須在黑暗中加入。細(xì)胞加了 BrdU 以后也可能光敏感,因此也在黑暗中培養(yǎng)。加入
BrdU 的時(shí)間和濃度根據(jù)細(xì)胞的類型和復(fù)制時(shí)間來(lái)確定,范圍在 15 分鐘到 2 個(gè)小時(shí),濃度從 10μM 到 100μM。
例如,處理鼠胚胎成纖維細(xì)胞為 30μM 處理 60 min。

聯(lián)系我們

郵箱:marketing@medicilon.com.cn

電話:02158591500


以上是關(guān)于細(xì)胞增殖檢測(cè)技術(shù)、細(xì)胞增殖檢測(cè)方法等內(nèi)容,信息來(lái)源于美迪西官網(wǎng)。


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