上海美迪西的生物部在體外生物學(xué)領(lǐng)域有豐富廣泛的經(jīng)驗(yàn)，通過酶水平測(cè)定、細(xì)胞水平測(cè)定、細(xì)胞生物學(xué)、生物化學(xué)、體外同位素測(cè)定、穩(wěn)定細(xì)胞株建立、基因敲除、RNAi和MicroRNA技術(shù)等，提供一套完整的生物學(xué)服務(wù)。

    美迪西細(xì)胞水平測(cè)定服務(wù)項(xiàng)目

    細(xì)胞毒性分析
細(xì)胞凋亡檢測(cè)分析
細(xì)胞遷移分析
細(xì)胞侵襲分析
HTRF 細(xì)胞水平檢測(cè)分析
免疫染色分析
免疫熒光分析(96/384 孔板)
報(bào)告基因分析(綠色熒光蛋白/熒光素酶)
放射性配體受體結(jié)合試驗(yàn)
細(xì)胞攝取分析
基因敲除分析
MicroRNA過表達(dá)分析
MicroRNA 敲除分析
有關(guān)腺病毒/逆轉(zhuǎn)錄病毒/慢病毒 載體的應(yīng)用分析
美迪西建立了100多種細(xì)胞株用于細(xì)胞水平測(cè)定。
乳腺癌細(xì)胞
大腸癌細(xì)胞
白血病細(xì)胞
肝癌細(xì)胞
腎癌細(xì)胞
肺癌細(xì)胞
黑素瘤細(xì)胞
卵巢癌細(xì)胞
胰腺細(xì)胞
胃癌細(xì)胞

了解細(xì)胞毒性服務(wù)詳情

細(xì)胞毒性是化學(xué)物質(zhì)(藥物)作用于細(xì)胞基本結(jié)構(gòu)和/或生理過程，如細(xì)胞膜或細(xì)胞骨架結(jié)構(gòu)，細(xì)胞的新陳代謝過程，細(xì)胞組分或產(chǎn)物的合成、降解或釋放，離子調(diào)控及細(xì)胞分裂等過程，導(dǎo)致細(xì)胞存活、增殖和/或功能的紊亂，所引發(fā)的不良反應(yīng)。

細(xì)胞毒性按作用機(jī)制可分3種類型:
①基本細(xì)胞毒性，涉及一種或多種上述結(jié)構(gòu)或功能的改變，作用于所有類型的細(xì)胞;
②選擇細(xì)胞毒性，存在于某些分化細(xì)胞上，主要通過化學(xué)物質(zhì)的生物轉(zhuǎn)化，與特殊受體結(jié)合或特殊的攝入機(jī)制所引發(fā)；
③細(xì)胞特殊功能毒性，對(duì)細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能損傷輕微，但對(duì)整個(gè)機(jī)體損傷非常嚴(yán)重。

細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)方案的確立在確定MTT法作為細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)的方法之后，我們對(duì)實(shí)驗(yàn)中可能涉及的各個(gè)參數(shù)進(jìn)行了摸索和優(yōu)化。最初，由于一切都是未知，因此常常幾個(gè)參數(shù)一起調(diào)整，使得各個(gè)參數(shù)對(duì)結(jié)果的影 響不是很清楚，走了一些彎路。后期逐漸摸清了參數(shù)對(duì)結(jié)果影響的權(quán)重，實(shí)驗(yàn)方案逐步確立。 
考慮的實(shí)驗(yàn)參數(shù)有:細(xì)胞批次、細(xì)胞密度、孵育時(shí)間、加藥次數(shù)、MTT 量、MTT 孵育時(shí) 間、DMSO溶解時(shí)間(振蕩時(shí)間)等。

細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)方法穩(wěn)定后的部分?jǐn)?shù)據(jù)在細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)方案穩(wěn)定之后，在各孔吸光度的標(biāo)準(zhǔn)差、變異系數(shù)和各孔抑制率的標(biāo)準(zhǔn)差都可以控制在很低的水平，表明該實(shí)驗(yàn)方案是穩(wěn)定的，具有良好的重現(xiàn)性。

細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)質(zhì)量評(píng)價(jià)指標(biāo)

對(duì)細(xì)胞毒性進(jìn)行質(zhì)量評(píng)價(jià)的指標(biāo)初步定為以下七條：
1、OD平均值:反映復(fù)孔間OD值的平均水平，OD值越大，細(xì)胞數(shù)越多。 
2、復(fù)孔OD值間的標(biāo)準(zhǔn)差(STDEV):反映各復(fù)孔OD值之間的離散情況。標(biāo)準(zhǔn)差越大，說明復(fù)孔間不平行性越大，操作誤差越大。
3、OD值間的變異系數(shù)(CV):也是反映復(fù)孔間OD值離散情況的指標(biāo)。由于OD值間的標(biāo)準(zhǔn)差(STDEV)的單位和OD的單位是一致的，不能體現(xiàn)離散的權(quán)重，因此引入變異系數(shù)(CV)。這一指標(biāo)以百分比的形式表現(xiàn)OD 值的離散情況，形象、直觀。 

    4、存活率(%Viability):計(jì)算各藥物濃度下細(xì)胞的存活率可以反映細(xì)胞存活情況，該值越大，說明藥物的細(xì)胞毒性作用越小。 

    5、存活率的標(biāo)準(zhǔn)差(%STDEV):該值反映如以每個(gè)復(fù)孔均作為單獨(dú)的實(shí)驗(yàn),則同批的復(fù)孔可以看作數(shù)批實(shí)驗(yàn)，此時(shí)存活率的分布情況。該指標(biāo)越大，說明復(fù)孔間越不平行。

    6、存活率的變異系數(shù)(%CV):該指標(biāo)反映各復(fù)孔間存活率的離散情況，該值越大，說明說明每一列細(xì)胞孔(即一系列稀釋單孔)間不平行性越大。 

7、半數(shù)致細(xì)胞毒性濃度:指對(duì)半數(shù)細(xì)胞產(chǎn)生 毒性作用所需濃度。該指標(biāo)可用來反映實(shí)驗(yàn)系統(tǒng)是否正常工作及評(píng)價(jià)未知藥物對(duì)細(xì)胞的毒性。

細(xì)胞毒性檢測(cè)方法

細(xì)胞毒性檢測(cè)主要是根據(jù)細(xì)胞膜通透性發(fā)生改變來進(jìn)行的檢測(cè)，常用以下幾種方法：
MTT、XTT法：利用線粒體內(nèi)部酶的活性，可以將特定的四唑鹽類進(jìn)行轉(zhuǎn)化，然后通過酶標(biāo)儀進(jìn)行檢測(cè)
LDH的方法：通過檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中LDH的酶活性，來檢測(cè)細(xì)胞毒性

其它酶方法：如檢測(cè)上清中堿性磷酸酶、酸性磷酸酶的活性等

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以上是關(guān)于的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)服務(wù)、細(xì)胞毒性檢測(cè)方法內(nèi)容，信息來源于美迪西官網(wǎng)。

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