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美迪西基因敲除服務(wù)目前已成功的應(yīng)用到細(xì)胞、酵母、植物、斑馬魚、小鼠、大鼠等模式生物中?;蚯贸褪峭ㄟ^同源重組將外源基因定點(diǎn)整合入靶細(xì)胞基因組上某一確定的位點(diǎn),以達(dá)到定點(diǎn)修飾改造染色體上某一基因的目的的一種技術(shù)。它克服了隨機(jī)整合的盲目性和偶然性,是一種理想的修飾、改造生物遺傳物質(zhì)的方法。
基因敲除服務(wù)項(xiàng)目
1、CRISPR/Cas9基因敲除小鼠技術(shù)服務(wù)
?技術(shù)流程:gRNA載體構(gòu)建=》gRNA和Cas9體外轉(zhuǎn)錄成mRNA=》mRNA顯微注射(F0模型生產(chǎn))
?提供如下技術(shù)服務(wù):
從gRNA載體構(gòu)建到F0模型生產(chǎn)的全包服務(wù)
客戶提供符合質(zhì)量要求的Cas9 RNA和gRNA,進(jìn)行后續(xù)顯微注射及模型生產(chǎn)
2、傳統(tǒng)ES打靶基因敲除/敲入小鼠技術(shù)服務(wù)
? 技術(shù)流程:打靶載體設(shè)計(jì)和構(gòu)建=》ES電轉(zhuǎn)和陽性克隆篩選=》ES顯微注射和嵌合體制備=》F1代小鼠繁殖和鑒定
?提供如下技術(shù)服務(wù):完全性基因敲除小鼠、條件性基因敲除小鼠、基因敲入小鼠
基因敲除小鼠
把小鼠所有的約三萬個(gè)基因中的一個(gè)或幾個(gè)基因敲除后,培養(yǎng)出的小鼠,就成為適合藥物臨床實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物模型,可以模仿人類患者進(jìn)行研究治療。例如,醫(yī)藥研發(fā)中有個(gè)關(guān)鍵環(huán)節(jié),就是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。為了研究治療癌癥的藥物,要有癌癥的小鼠模型;為了研究糖尿病,要有糖尿病的小鼠模型。
基因敲除小鼠
基因敲除基本步驟
1、ES細(xì)胞的獲得
2、基因載體的構(gòu)建
3、目的基因?qū)?/span>
4、用選擇性培養(yǎng)基篩選已擊中的細(xì)胞
5、通過觀察嵌和體小鼠的生物學(xué)形狀的變化進(jìn)而了解目的基因變化前后對小鼠的生物學(xué)形狀的改變,達(dá)到研究目的基因的目的。
基因敲除的應(yīng)用領(lǐng)域
1、建立人類疾病的轉(zhuǎn)基因動(dòng)物模型,為醫(yī)學(xué)研究提供材料
2、改造動(dòng)物基因型,鑒定新基因和/或其新功能,研究發(fā)育生物學(xué)
3、治療遺傳病
4、改造生物、培育新的生物品種