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新聞資訊

常見(jiàn)腫瘤動(dòng)物模型一覽

2016-05-19
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美迪西動(dòng)物腫瘤模型

癌癥類型(腫瘤模型)細(xì)胞系
頭頸KB,  FaDu
鼻咽癌

干細(xì)胞

S18,  S26
肺癌DMS114,  NCI-H69, NCl-H146, NCl-h309, NCI-H446, NCI-H526, NCI-H1688, 95-D, A549,  Calu-1, Calu-3, Calu-6, HCC827, NCI-h326, NCI-h392, NCI-H358, NCI-H441,  NCI-H460, NCI-H520, NCI-H522, NCI-H1299, NCI-H1437, NCI-H1650, NCI-H1975,  NCI-H1993, NCI-h3009, NCI-h3122, NCI-h3126, NCI-h3228, PC-10, QG-56,LLC1,KLN205
乳腺癌SUM159,  MDA-MB-231, MDA-MB-468, Bcap-37, 2LMP, ZR-75-1, ZR-75-30,4T1, EMT6
胃癌MKN-45, NCI-N87, BGC-823, HGC-27, MKN-28, NUGC-3,  SCH, SGC-7901, SNU-5, SNU-16, MGC-803
胰腺癌AsPC-1,BxPC-3, Capan-1,  Capan-2, CFPAC-1, HPAF-II,  MIAPaCa-2, PANC-1
腎癌ACHN,  OS-RC-2, 786-O,RENCA
肝癌Bel-7402, Hep-3B, Huh-7, PLC/PRF/5,  QGY-7703, SK-HEP-1, SMMC-7721, HepG-2
膠質(zhì)母細(xì)胞瘤U87-MG
結(jié)腸和盲腸癌癥CT-26,MC38,COLO  201, COLO 205, COLO 320 DM, CW-2, DLD-1, HCT-8, HCT-15, HCT-116, HCT116 P53  K0(-/-), HT-29, LoVo, LS1034, LS174T, LS411N, NCI-H716, RKO , SW48, SW620
前列腺癌22Rv1,  CL-1, DU145, LNCap Clone FGC, PC-3
膀胱HT-1197,  HT-1376, RT4, SCaBER, SW780, T24
卵巢癌ES-2,  HO-8910PM, PA-1, SK-OV-3, OVCAR-3
子宮內(nèi)膜/ HysterocarcinomaAN3  CA, HEC-1-A, ME-180, MFE-280
皮膚癌細(xì)胞A431
黑色素瘤A375,  B16, A2058, C32, HMCB, SK-MEL-30, MDA-MB-435s
骨肉瘤細(xì)胞MG-63,  SJSA-1
肉瘤S-180
肌肉,條紋SJCRH30
骨髓瘤KMS-11,  KMS-26, RPMI-8226
白血病/淋巴瘤U937, THP-1, MV-4-11, HEL, TF-1a, ML-2, HL-60, L1210, K562, KARPAS-299, Daudi,  Raji, Ramos, ARH-77, KMS-12-BM, KG-1,WEHI-3,A20,EL4

腫瘤動(dòng)物模型

腫瘤動(dòng)物模型可分為三類:

自發(fā)性腫瘤動(dòng)物模型

誘發(fā)性腫瘤動(dòng)物模型

移植性腫瘤動(dòng)物模型

1、自發(fā)性腫瘤動(dòng)物模型:未經(jīng)人為處理;自然發(fā)生;

自發(fā)性腫瘤的總體評(píng)價(jià)——?jiǎng)游镒园l(fā)性腫瘤的病因往往是由動(dòng)物的遺傳特性決定的,與人癌的病因有較大距離。各動(dòng)物腫瘤生長(zhǎng)速度差異較大, 很難在限定時(shí)間內(nèi)獲得大量生長(zhǎng)均勻的荷瘤動(dòng)物(tumor-bearing animals)。因此,自發(fā)性腫瘤動(dòng)物模型很少在抗腫瘤藥物的常規(guī)篩選中廣泛應(yīng)用。

2、誘發(fā)性腫瘤動(dòng)物模型:在實(shí)驗(yàn)條件下; 使用致癌物(carcinogens); 誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生腫瘤

(animal model of induced tumor)指使用致癌因素(carcinogens)在實(shí)驗(yàn)條件下誘發(fā)動(dòng)物發(fā)生腫瘤的動(dòng)物模型,它是進(jìn)行實(shí)驗(yàn)?zāi)[瘤學(xué)研究的常用方法。常用于驗(yàn)證可疑致癌因素的作用,也越來(lái)越多地應(yīng)用于腫瘤發(fā)生機(jī)理的研究及防治效果的觀察上,在腫瘤病因?qū)W、遺傳學(xué)、生物學(xué)等方面的研究中有重要地位。由于誘發(fā)因素和條件可人為控制,誘發(fā)率遠(yuǎn)高于自然發(fā)病率,故在腫瘤實(shí)驗(yàn)研究中優(yōu)于自發(fā)瘤。

用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性腫瘤的動(dòng)物種類很多,它們因種族不同而對(duì)相同致癌因素有不同的反應(yīng)性。常用的動(dòng)物以哺乳動(dòng)物為主,其中嚙齒類動(dòng)物的使用最多,應(yīng)用最廣,包括各種大鼠、小鼠、豚鼠等。

誘發(fā)性腫瘤模型的原理是利用外源性致癌因素引起細(xì)胞遺傳特性異常而呈現(xiàn)出異常生長(zhǎng)和高增殖活性,形成腫瘤。致癌因素主要有化學(xué)性、物理性及生物性致癌物,而化學(xué)性致癌物(chemical carcinogens)最常見(jiàn),已確知的多達(dá)一千余種,用于誘發(fā)實(shí)驗(yàn)性腫瘤的種類亦很多,如苯并芘、甲基膽蒽、聯(lián)苯胺、亞硝胺類、黃曲霉毒素類。各種致癌物的致癌強(qiáng)度、致癌譜等特性相差較大,同一種致癌物經(jīng)不同途徑給藥所致腫瘤部位或類型可有很大差異。有些化學(xué)性致癌物具有明顯的親器官或組織特性。因此,實(shí)驗(yàn)工作中應(yīng)根據(jù)需要選用適當(dāng)致癌物和致癌途徑,并確定其他影響因素或?qū)嶒?yàn)條件。

基本原理:利用外源性致癌物引起細(xì)胞遺傳特性改變,從而出現(xiàn)異常生長(zhǎng)和高增殖活性細(xì)胞,形成腫瘤。外源性致癌物主要有化學(xué)性、物理性(如放射性物質(zhì))及生物性(如誘發(fā)動(dòng)物腫瘤的病毒),其中以化學(xué)性致癌物最為常用。

①誘發(fā)性腫瘤動(dòng)物模型的基本方法:實(shí)驗(yàn)時(shí),必需注意選擇合適的致癌方法、動(dòng)物種系、致癌物及其溶劑、給予劑量、途徑以及觀察時(shí)間等。致癌物的劑量應(yīng)能保證動(dòng)物的存活率較高、誘發(fā)期較短和誘發(fā)腫瘤頻率較高。

常用的致癌物給予方法和途徑:

a.涂抹法: 涂抹在背部及耳部皮膚,主要用于誘發(fā)皮膚腫瘤。

b.經(jīng)口給藥法:通過(guò)飲水、飼料或灌喂動(dòng)物。常用于食道癌、胃癌及大腸癌等。

c.注射法:致癌物制成溶液,經(jīng)皮下、肌內(nèi)、靜脈或體腔等途徑注入體內(nèi),本法較常用。

d.氣管注入法:常用于誘發(fā)肺癌。

e.穿線法:將致癌物置于無(wú)菌試管內(nèi),加熱使之液化,吸附于預(yù)制的線結(jié)上,再將此線結(jié)穿入靶組織而誘發(fā)腫瘤。

f.埋藏法:包埋于皮下或其他組織內(nèi)。

②誘發(fā)性腫瘤模型的動(dòng)物和致癌物

動(dòng)物:大鼠,小鼠,犬等

致癌物:多環(huán)碳?xì)漕?、亞硝胺類、偶氮類、黃曲霉毒素(飼料中含0.001~0.015ppm黃曲霉毒素B1, 喂養(yǎng)6個(gè)月,誘發(fā)大鼠肝癌)。

誘發(fā)性腫瘤模型的總體評(píng)價(jià):約80%人癌是由環(huán)境因素引起的,誘發(fā)性腫瘤的病因與人癌的情況近似,且均經(jīng)過(guò)較長(zhǎng)演變過(guò)程而成瘤。動(dòng)物誘發(fā)性腫瘤是比較類似于人類腫瘤的動(dòng)物模型。然而,人癌的發(fā)生原因十分復(fù)雜,往往并非由已知的動(dòng)物致癌物所引起。另外,動(dòng)物誘發(fā)性腫瘤的組織病理類型、發(fā)生發(fā)展過(guò)程也不一定與人癌完全一致。

本模型的最大困難是誘癌時(shí)間長(zhǎng)、成癌率常達(dá)不到100%, 而且動(dòng)物之間腫瘤發(fā)生時(shí)間、發(fā)展速度的個(gè)體差異很大, 難以將未治療的動(dòng)物作為治療動(dòng)物的對(duì)照。

3、移植性腫瘤動(dòng)物模型

移植性腫瘤動(dòng)物模型是指將動(dòng)物或人體腫瘤移植到同種或異種動(dòng)物體內(nèi)連續(xù)傳代而形成的腫瘤。

該實(shí)驗(yàn)法是抗腫瘤藥物篩選最常用的體內(nèi)方法,具有重要作用。目前臨床上常用的抗腫瘤藥大多是首先經(jīng)該實(shí)驗(yàn)法而被發(fā)現(xiàn)的。

一般給予試驗(yàn)藥7~10d,在第8~11d可解剖動(dòng)物獲得結(jié)果。通過(guò)一些指標(biāo)的觀察,可以判斷試驗(yàn)藥是否有具有抑制腫瘤生長(zhǎng)的作用。這是任何體外試驗(yàn)所不能替代的,其結(jié)果可為抗癌藥物療效提供重要依據(jù)。

它比前述的自發(fā)性和誘發(fā)性動(dòng)物腫瘤更易實(shí)施。 現(xiàn)有移植性腫瘤接種成功率可達(dá)100%, 可在同一時(shí)間內(nèi)獲得大量(數(shù)十至百余只動(dòng)物)、生長(zhǎng)相當(dāng)均勻的腫瘤。

①、動(dòng)物的選擇

移植性腫瘤常用的動(dòng)物為小鼠、大鼠和地鼠。研究藥物的抗腫瘤作用可選擇三種或三種以上小鼠、大鼠的移植性腫瘤進(jìn)行實(shí)驗(yàn)治療;抗腫瘤藥物篩選時(shí),每批動(dòng)物的來(lái)源應(yīng)一致;

根據(jù)瘤株的特點(diǎn)選用近交系、遠(yuǎn)交系或F1動(dòng)物;雌雄性動(dòng)物均可應(yīng)用(乳腺癌等必須用雌性動(dòng)物)。

▲每批實(shí)驗(yàn)只用同一性別動(dòng)物。

▲小鼠體重18~22g,大鼠體重50~70g

▲每組至少10只動(dòng)物,裸鼠可用5~10只。

②、腫瘤細(xì)胞的選擇

復(fù)制移植性腫瘤模型需要使用腫瘤細(xì)胞株(瘤株,tumor strain)或細(xì)胞系(cell line)。

細(xì)胞株(cell strain)是指通過(guò)選擇法或克隆法從原代培養(yǎng)物或細(xì)胞系中獲得的具有特殊遺傳、生化性質(zhì)或特異標(biāo)記的細(xì)胞群。

瘤株的組織學(xué)類型和生長(zhǎng)特征趨于穩(wěn)定,并能在同系、同種或異種動(dòng)物體內(nèi)移植并連續(xù)傳代。

生長(zhǎng)特征,包括接種成活率、生長(zhǎng)速度、自動(dòng)消退率、宿主壽命與宿主反應(yīng)等。

細(xì)胞系:原代培養(yǎng)物經(jīng)首次傳代成功后即為細(xì)胞系,由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細(xì)胞世系所組成。

③、接種方法

(一)一般要求

整個(gè)操作應(yīng)在無(wú)菌條件下進(jìn)行,可在無(wú)菌室和超凈工作臺(tái)內(nèi)操作。動(dòng)物處死后消毒皮膚,對(duì)每個(gè)實(shí)體瘤應(yīng)分別使用滅菌的外科器械切取,對(duì)腹水瘤則應(yīng)分別用滅菌的注射器抽吸。

瘤塊污染常是接種失敗的主要原因,應(yīng)特別注意!!在高溫季節(jié)操作時(shí),可在盛有瘤源的器皿周圍放置冰塊直接降溫。

常用接種部位:

實(shí)體瘤_____腋窩皮下

肌肉接種___大腿肌肉

腹水型腫瘤__腹腔

④、腫瘤細(xì)胞的凍存與復(fù)蘇

為了使腫瘤細(xì)胞能得以長(zhǎng)期使用,防止退化或變異,保存不同代細(xì)胞的特征,對(duì)腫瘤細(xì)胞或瘤株進(jìn)行冷凍保存是很必要的。一般在液氮中凍存1~2年,細(xì)胞存活率可達(dá)80%~90%。

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