D-二聚體水平在某些疾病的血清學(xué)診斷和臨床病理研究中具有重要價(jià)值：研究表明，D-二聚體水平與乳腺癌的鑒別診斷和臨床病理特征顯著相關(guān)。 D-二聚體參與凝血激活，已應(yīng)用于靜脈血栓栓塞癥（VTE）的診斷，此外D-二聚體水平在多種癌癥中升高，并與預(yù)后不良和對(duì)治療的抵抗力相關(guān)。 Sysmex CS-5100自動(dòng)凝血分析儀是臨床病理實(shí)驗(yàn)室常用儀器，可用于檢測(cè)D-二聚體含量。

D-二聚體的水平與臨床病理特征的關(guān)系

D-二聚體是交聯(lián)纖維蛋白的可溶性降解產(chǎn)物，常用于診斷彌散性血管內(nèi)凝血和血栓栓塞性疾病，如深靜脈血栓形成（DVT）和肺栓塞（PE）。與采用全血凝集測(cè)定和酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定等方法的其他測(cè)定相比，免疫熒光或乳膠凝集測(cè)定已成為檢查D-二聚體的最廣泛使用的方法，因?yàn)樗鼈兘Y(jié)合了方便和相對(duì)較高的靈敏度和特異性的優(yōu)點(diǎn)。然而，許多研究人員認(rèn)為，嗜異性抗體可能會(huì)干擾D-二聚體檢測(cè)的解釋，并且還有其他因素也可能干擾凝血試驗(yàn)的結(jié)果，如心力衰竭、感染和使用抗凝血藥物。

大量的文獻(xiàn)表明，腫瘤可以引起患者D-二聚體濃度升高，并且可以作為分期、預(yù)后等判斷標(biāo)準(zhǔn)。已知凝血和纖維蛋白溶解的激活通常與惡性腫瘤有關(guān)，盡管所涉及的機(jī)制尚未完全闡明。據(jù)報(bào)道，這種激活的程度與某些惡性腫瘤（包括結(jié)直腸癌）的腫瘤分期和預(yù)后相關(guān)。D-二聚體是纖維蛋白降解的穩(wěn)定終產(chǎn)物，并且 D-二聚體的水平通過(guò)增強(qiáng)的纖維蛋白形成和纖維蛋白溶解而升高，它是高凝階段的標(biāo)志。各種實(shí)體瘤患者血漿中的 D-二聚體水平升高. 有研究者評(píng)估了 D-二聚體水平的臨床意義以及血漿 D-二聚體水平與結(jié)直腸癌手術(shù)前后臨床病理結(jié)果之間的關(guān)系。

研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)結(jié)直腸癌患者存在高凝狀態(tài)和較高的纖溶活性。手術(shù)創(chuàng)傷可增強(qiáng)結(jié)直腸癌患者的纖溶作用。術(shù)前 D-二聚體水平的測(cè)量被認(rèn)為有助于預(yù)測(cè)結(jié)直腸癌的淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和分期^[4]。

臨床病理研究案例

一名82歲的女性因診斷為慢性心力衰竭入院，檢查結(jié)果顯示D-二聚體水平顯著升高，超出了全自動(dòng)凝血分析儀Sysmex CS-5100 System?的合格范圍（> 100 mg/L）。已知患者的特征和疾病，如衰老；懷孕；近期受傷、手術(shù)或創(chuàng)傷；敗血癥；癌癥；一些肝臟或腎臟疾病也與D-二聚體水平升高有關(guān)。

為了排除任何這些合并癥的影響，科學(xué)家們確認(rèn)了她的病史并進(jìn)行了一系列血清測(cè)試?？紤]到她的年齡和性別，所有檢查的結(jié)果都在正常的參考范圍內(nèi)，她的相關(guān)病史為陰性。

在這種情況下，科學(xué)家們反復(fù)測(cè)試證實(shí)她的D-二聚體水平顯著高于合格范圍。然而，患者沒(méi)有相關(guān)的臨床癥狀或平FDP值和其他表明血栓形成的凝血參數(shù)異常的放射學(xué)證據(jù)，因此出現(xiàn)了干擾的可能性。作為診斷車間的第一步，將樣品手動(dòng)稀釋至不同水平，然后使用Innovaccer D-二聚體測(cè)定進(jìn)行校準(zhǔn)?；颊呓Y(jié)果顯示線性緩解較弱（R2稀釋時(shí)= 0.9186），而平行樣品與標(biāo)準(zhǔn)曲線相似（R2= 0.9997，圖A）。稀釋是一種在測(cè)試結(jié)果非常高時(shí)用于驗(yàn)證干擾的方法，然而，較弱的線性響應(yīng)或非線性響應(yīng)可能導(dǎo)致對(duì)可疑干擾的錯(cuò)誤確認(rèn)。

患者（紅色，實(shí)線）和平行樣品（黑色，虛線）中的D-二聚體值與手動(dòng)稀釋率之間的相關(guān)性

如圖B，乳膠凝集測(cè)定使用涂有D-二聚體特異性抗體的乳膠珠，在存在 D-二聚體、乳膠珠和嗜異性抗體的情況下，通過(guò)濁度檢測(cè)凝集：

為了確認(rèn)差異，科學(xué)家們又進(jìn)行了一系列實(shí)驗(yàn)，包括樣品稀釋、通過(guò)替代方法重新分析以及通過(guò)阻斷特定嗜異性抗體進(jìn)行樣品處理。 在采用這些方法后，在樣品中觀察到升高的 D-二聚體值顯著消失（分別為 4.49、9.42、9.06 和 12.58 mg/L）。這證實(shí)了在這種情況下存在嗜異性抗體。

Sysmex CS-5100全自動(dòng)凝血分析儀

在現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室中，大多數(shù)用于臨床化學(xué)、血液學(xué)和止血學(xué)的分析儀都是自動(dòng)化的，以縮短周轉(zhuǎn)時(shí)間（TAT）（特別是對(duì)于急診室和重癥監(jiān)護(hù)室的樣本），并最大限度地減少操作它們所需的人員 任何新的凝血分析儀都必須與用于測(cè)量標(biāo)準(zhǔn)參數(shù)（PT、PTT、纖維蛋白原、 抗凝血酶，D-二聚體）。特別是在與輸血服務(wù)相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室中，必須精確測(cè)量單因素活性才能獲得所需的所有官方許可證。該系統(tǒng)還應(yīng)執(zhí)行更具體的測(cè)定，例如蛋白C，蛋白S，血管性血友病測(cè)定。

在上述案例中，實(shí)驗(yàn)使用Sysmex CS-5100 System（Siemens Healthcare Diagnostics, Erlangen, Germany）對(duì)檸檬酸鹽血漿樣品的 D-dimer 參數(shù)進(jìn)行了評(píng)估，這是一種顆粒增強(qiáng)的免疫比濁法，靈敏度和特異性分別為97%和91%。她的D-二聚體測(cè)試在接下來(lái)的2周內(nèi)重復(fù)進(jìn)行，并且使用相同的測(cè)試方法始終存在極高的值 (> 100 mg/L)，排除分析錯(cuò)誤，例如移液不準(zhǔn)確、洗滌不充分、示蹤劑聚集或其他污染。她的FDP也繼續(xù)保持適度升高。

Sysmex CS-5100系統(tǒng)是一款全自動(dòng)、計(jì)算機(jī)接口的凝血分析儀，用于體外診斷。該分析儀有 36個(gè)培養(yǎng)孔和 20個(gè)測(cè)量通道。Sysmex系統(tǒng)能夠進(jìn)行凝血，顯色和免疫學(xué)測(cè)試。吸光度測(cè)量單元使用波長(zhǎng)為340、405、575、660 和 800 nm的鹵素?zé)簟?/p>

該分析儀可容納10個(gè)樣品架，每個(gè)架子有10個(gè)樣品，能夠在同一架子上同時(shí)混合來(lái)自不同制造商的初級(jí)管。使用機(jī)架系統(tǒng)可在船上存儲(chǔ)多達(dá) 40 種試劑，這些試劑均在10°C ±2°C 下冷卻。在環(huán)境溫度下，五個(gè)額外的位置專用于緩沖液或沖洗溶液。此外，還有五個(gè)可以連續(xù)加載的 STAT 位置;分析儀將立即開(kāi)始測(cè)量樣品。樣品、質(zhì)控品和試劑由條形碼閱讀器識(shí)別。由于對(duì)照血漿可以包含在試劑區(qū)域，因此可以隨時(shí)進(jìn)行對(duì)照測(cè)量，例如在使用新試劑瓶時(shí)。也可以從裝載在樣品架上的 4 mL 杯上運(yùn)行對(duì)照，以避免減少可用試劑位置的數(shù)量。

在測(cè)量過(guò)程中，可以連續(xù)加載比色皿（最多1000個(gè)）和樣品。如果需要更換試劑，系統(tǒng)將在下一個(gè)可行時(shí)間停止運(yùn)行。先進(jìn)的軟件算法記錄、監(jiān)測(cè)和檢查反應(yīng)動(dòng)力學(xué)以確定正確的凝血時(shí)間。此外，系統(tǒng)還提供所有加載試劑的概覽，顯示剩余測(cè)試的數(shù)量以及自試劑上傳到分析儀以來(lái)的時(shí)間。與系統(tǒng)管理器的連接是可選的。

美迪西臨床病理室為隸屬于病理研究部的GLP醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室；實(shí)驗(yàn)室主要負(fù)責(zé)檢測(cè)多種動(dòng)物生物化學(xué)、血液學(xué)、凝血、尿液分析、尿液沉渣鏡檢、淋巴細(xì)胞分型、體外溶血、骨髓涂片鏡檢以及動(dòng)物體檢等項(xiàng)目，為動(dòng)物試驗(yàn)提供準(zhǔn)確科學(xué)的檢驗(yàn)依據(jù)。 2018年起實(shí)驗(yàn)室參加了上海市臨床檢驗(yàn)中心的室間質(zhì)評(píng)，并連續(xù)四年所有項(xiàng)目全部合格，取得上海市臨檢中心頒發(fā)的證書。

參考文獻(xiàn)：

[1] Han-Xiao Sun, Hong Ge, et al. Clinical laboratory investigation of a patient with an extremely high D-dimer level: A case report. World J Clin Cases. 2020 Aug 26;8(16):3560-3566. doi: 10.12998/wjcc.v8.i16.3560.

[2] G L Salvagno, G Lippi, et al. Analytical comparison of AxSYM, HemosIL DD HS and Innovance D-dimer immunoassays with the Vidas D-dimer. Int J Lab Hematol. 2009 Aug;31(4):475-7. doi: 10.1111/j.1751-553X.2008.01077.

[3] T. Flieder, T. Gripp, et al. The Sysmex CS-5100 coagulation analyzer offers comparable analytical performance and excellent throughput capabilities. Pract Lab Med. 2016 Dec 1; 6: 38–47. Published online 2016 Sep 21. doi: 10.1016/j.plabm.2016.09.002.

[4] Gang Xu, Ya-Li Zhang, and Wen Huang. Relationship between plasma D-dimer levels and clinicopathologic parameters in resectable colorectal cancer patients. World J Gastroenterol. 2004 Mar 15; 10(6): 922–923. doi: 10.3748/wjg.v10.i6.922